膠體金在水產(chǎn)動(dòng)物藥物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

　　近年來(lái)，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖規(guī)模的擴(kuò)大和產(chǎn)量的不斷增多，及一些化學(xué)合成被廣泛用于的防治，或添加于飼料中以水生動(dòng)物的生長(zhǎng)。在發(fā)揮積極作用的同時(shí)，部分或其代謝產(chǎn)物則殘留在水生動(dòng)物的體內(nèi)，產(chǎn)生了水產(chǎn)品的殘留。雖然水產(chǎn)品的殘留量較低，但是通過(guò)食物鏈的長(zhǎng)期富集，對(duì)人類健康卻具有很大的危害，并己成為人類健康的一大隱形殺手。
　　四環(huán)素類是一種廣譜，該類濫用可引起其在動(dòng)物的肌肉、奶、肝臟中的殘留，嚴(yán)重危害人類健康。檀尊社等將抗四環(huán)素單克隆抗體一膠體金復(fù)合物包被在膠體金結(jié)合墊上，并將人工合成的四環(huán)素抗原包被在硝酸纖維素的檢測(cè)線(T線)，采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法建立了用于檢測(cè)水產(chǎn)品中四環(huán)素類殘留含量的膠體金免疫層析檢測(cè)試劑條。其靈敏度可達(dá)100ng/mL，整個(gè)檢測(cè)過(guò)程僅需5~10min，并且與金霉素、土霉素、霉素等四環(huán)素族有的交叉反應(yīng)，而與沙丁胺醇、萊克多巴胺等其他獸藥無(wú)交叉反應(yīng)。因此可同時(shí)檢測(cè)四環(huán)素族中幾種主要，并可作為四環(huán)素殘留現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控的篩檢手段。
　　氯霉素是一種   廣譜，常用于動(dòng)物各種傳染性的。但其對(duì)人體有嚴(yán)重的毒副作用。目前美國(guó)和歐共體己禁止在食用性動(dòng)物中使用氯霉素，并規(guī)定在動(dòng)物源性食品中不得檢出。張燕等用氯霉素多克隆抗體標(biāo)記膠體金，將人工合成的氯霉素抗原包被在NC膜的檢測(cè)線上，羊抗兔抗體包被在指控線上，采用競(jìng)爭(zhēng)法建立了檢測(cè)淡水魚(yú)及牛乳中的氯霉素殘留方法。靈敏度可達(dá)1μg/L，并且與其他常見(jiàn)獸藥均無(wú)交叉反應(yīng)，可作為水產(chǎn)品中氯霉素殘留現(xiàn)場(chǎng)大量篩選的手段。鑒于此有學(xué)者用ELISA和GICA檢測(cè)方法對(duì)水產(chǎn)品種氯霉素殘留進(jìn)行了檢測(cè)。經(jīng)測(cè)定，GICA的檢測(cè)限為1.000μg/kg，對(duì)ELISA的陰性符合率為94.7%，陽(yáng)性符合率為92.3%，總符合率達(dá)到92.5%，基本滿足適合水產(chǎn)品中氯霉素殘留的現(xiàn)場(chǎng)篩選的要求。
　　硝基呋喃類(Nitrofurans)是人工合成的廣譜，主要包括呋喃唑酮、呋喃西林、呋喃妥因和呋喃它酮，曾經(jīng)被廣泛用于在畜禽、水產(chǎn)養(yǎng)殖中防治性和提高飼料利用率。但近年來(lái)研究顯示，硝基呋喃類及其代謝物存在致癌致突變的危害，嚴(yán)重危害人類健康。柳愛(ài)春等在酸性條件下，以4-撥基苯甲醛為衍生化試劑分別與4種硝基呋喃類代謝物(AOZ、SEM、AMOZ和AHD)反應(yīng)制成相應(yīng)半抗原：CPAOZ、CPSEM、CPAMOZ和CPAHD，采用碳二亞胺法將半抗原與牛血清蛋白偶聯(lián)合成人工抗原：CPAOZ-BSA、CPSEM-BSA、CPAMOZ-BSA和CPAHD-BSA，在此基礎(chǔ)上研制成4種硝基呋喃代謝物膠體金試劑條，   低檢出限分別為0.5、1.0、1.0和2.0μg/kg，相互間的交叉反應(yīng)率小于0.1%。Xu和Liu等采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法建立了用于檢測(cè)動(dòng)物源性呋喃妥因殘留的膠體金免疫層析試紙條，該試紙條具有較高的特異性，其靈敏度為10ng/mL，在15min之內(nèi)就能檢測(cè)到結(jié)果，成本低，方便，，尤其適合在野外的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
　　磺胺類(SulfonamIdes)是一類用于預(yù)防與感染性的化學(xué)性。目前中國(guó)、歐盟、美國(guó)、日本等   均將磺胺類列為動(dòng)物飼養(yǎng)過(guò)程中限制使用的。韓靜，劉恩梅等將對(duì)磺胺類具有廣譜特異性的多克隆抗體一膠體金復(fù)合物噴涂在玻璃纖維上，并將人工合成的包被抗原(SAs-OVA)、羊抗兔二抗分別固定在NC膜的T線和C線上，采用免疫競(jìng)爭(zhēng)法建立了一種用于檢測(cè)動(dòng)物源性食品中五種磺胺類，磺胺異噁唑(SIZ)、磺胺噻唑(STZ)、磺胺對(duì)甲氧嘧啶(SME)、磺胺甲二唑(SMT)，磺胺氯噠嗪(SCPA)殘留的膠體金免疫層析方法。該方法可檢測(cè)卿魚(yú)肉中磺胺類的殘留，檢測(cè)限為0.01μg/kg，檢測(cè)時(shí)間小于10min，可作為磺胺類多殘留現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控的篩檢手段。王錢等同樣采取競(jìng)爭(zhēng)法建立了一種檢測(cè)組織樣品中磺胺甲噁唑殘留的膠體金試紙條，靈敏度可達(dá)20μg/L，檢測(cè)時(shí)間僅為3~5min，可作為組織中磺胺甲噁唑殘留現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)控的篩檢手段。
　　氟喹諾酮類(fhtomquinolones，F(xiàn)Qs)藥是一類人工合成藥，己經(jīng)成為水產(chǎn)養(yǎng)殖中普遍使用的   抗感染之一，被廣泛應(yīng)用于各種水產(chǎn)動(dòng)物的預(yù)防和。馮婷婷等用膠體金標(biāo)記抗氟喹諾酮類的廣譜性單克隆抗體，將諾氟沙星-卵清蛋白噴涂在檢測(cè)線上，羊抗小鼠二抗噴涂在質(zhì)控線上，建立了一種檢測(cè)能同時(shí)檢測(cè)環(huán)丙沙星、恩諾沙星等11種氟喹諾酮類的膠體金試紙條，滿足了在蝦和雞肉中氟喹諾酮類殘留現(xiàn)場(chǎng)大量篩查的要求。
　　孔雀石綠(MG)，在水產(chǎn)上常用作水霉病、鰓霉病、小瓜蟲(chóng)病等，但由于其具有高毒素、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用，2002年我國(guó)己將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用。但由于其廉，且尚無(wú)較好的替代藥，目前仍有許多養(yǎng)殖戶在違規(guī)使用。桑麗雅等采用競(jìng)爭(zhēng)法，即用膠體金標(biāo)記孔雀石綠單克隆抗體，將人工合成的包被抗原(MG-OVA)和羊抗鼠哪分別包被在NC膜的檢測(cè)線和質(zhì)控線上，建立了檢測(cè)水產(chǎn)品中孔雀石綠殘留的膠體金試紙條，該試紙條對(duì)水產(chǎn)品中孔雀石綠和隱性孔雀石綠的   低檢出限分別為1μg/kg和3μg/kg，檢測(cè)結(jié)果與液相一串聯(lián)質(zhì)譜法的檢測(cè)結(jié)果一致，滿足基層現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中的需要。趙春城等同樣采用競(jìng)爭(zhēng)法建立了孔雀石綠代謝物一無(wú)色孔雀石綠的膠體金試紙條，   低檢出限為20μg/L，但與孔雀石綠有20%的交叉反應(yīng)率。與ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果的符合率為90%，基本滿足現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)的需要。