免疫膠體金技術自誕生以來便以其簡便、特異敏感等優(yōu)點被廣泛應用于檢測和現(xiàn)場診斷,顯示出巨大的發(fā)展?jié)摿蛷V闊的應用前景。膠體金免疫技術在實際研究及應用過程中仍存在一些不足之處: 先,該方法在檢測過程中常出現(xiàn)假陽性和假陰性問題;其次,檢測的靈敏度及可重復性程度不高,檢測范圍需要進一步擴展; 后,因免疫膠體金技術是以膠體金納米顆粒作為標記物,顆粒本身的一些特性也導致免疫膠體金技術的應用受到限制,如在操作過程中要求清潔程度高,膠體金溶液的穩(wěn)定性較差,存放時問短,膠體金顆粒大,滲透能力較差等。
免疫膠體金技術應在解決這些問題的基礎上向以下幾方面發(fā)展:進一步提高金標試驗的敏感性、特異性、實現(xiàn)多元檢測、實現(xiàn)定量或半定量檢測是未來金標免疫試驗發(fā)展的方向,具體包括:
,提高膠體金質(zhì)量。進一步完善免疫膠體金的制備工藝,使之標準化、程序化,以利于提高檢測準確性和可重復性,從而減少假陰性(假陽性)結(jié)果的產(chǎn)生。
,進一步提高檢測靈敏度。為放大特異性抗原抗體的反應信號,增強膠體金的顯色效果,可采用生物素親和索系統(tǒng)(BAS)或免疫金銀染色法(IGss)等措施,并結(jié)合一些相應的生物傳感器、電化學設備來拓寬其檢測范圍。TANG等基于鉑金電極修飾的膠體金提高了生物傳感器檢測HABS表面抗體的敏感性和穩(wěn)定性;KITANO等用基于膠體金表面等離子共振效應的電感受器測定胃蛋白酶的親和常數(shù)。
第三,實現(xiàn)多元檢測。可采用多膜復合或單膜多元受體固定2種方式,一次檢測可同時多組結(jié)果,節(jié)省檢測時間及成本,這對于檢測某些具有聯(lián)檢意義的物質(zhì)具有很大的應用價值。BUECHLER等用一膜包被多元抗體帶的方法研制出了可同時檢測乙型表面抗原、艾滋病病毒抗體和抗原及丙型抗體的免疫層析試紙條,多元檢測在獸醫(yī)檢測上的應用還值得期待。
第四,實現(xiàn)定量測定。目前,免疫膠體金技術定量檢測有3種類型:第1種是通過試紙條的顏色深淺的視覺比較將結(jié)果分為陰性、弱陽性、中陽性和強陽性;第2種是將檢測線的反應劑設計成只能結(jié)合已知量的分析物,任何過量的分析物將會和下一條檢測線結(jié)合,產(chǎn)生一個溫度計式的條帶梯度;第3種是應用反射的光密度計測量顯色帶或斑點的顏色強度,將顏色強度轉(zhuǎn)化為數(shù)字指標。前兩種檢測方法雖簡便,但只能提供半定量結(jié)果,第3種檢測方法雖能實現(xiàn)定量檢測,但需的儀器,操作不便。新的、簡便實用的定量檢測技術的實現(xiàn)將使免疫膠體金技術在毒素檢測上 為廣泛的應用。
總之,免疫膠體金技術是繼三大標記技術之后,又一較為成熟且已廣泛應用的免疫標記技術。在今后的研究中,免疫膠體金技術將 進一步顯示其巨大的優(yōu)越性,同時也將在 為廣闊的內(nèi)發(fā)揮其作用。