金標(biāo)卡殼GICA技術(shù)及其原理

　　膠體金免疫層析(ColloidalGoldImmunochroma-tographyAssay，GICA)技術(shù)是以膠體金作為標(biāo)記物檢測(cè)特定抗體或抗原的一種新型的固相免疫標(biāo)記技術(shù)。金標(biāo)卡殼GICA技術(shù)將膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)和層析分析技術(shù)等多種檢測(cè)方法地結(jié)合在了一起，是繼熒光素、酶標(biāo)記和放射性同位素技術(shù)之后的又一重要的新型免疫標(biāo)記技術(shù)。目前，GICA技術(shù)已被廣泛應(yīng)用于妊娠檢測(cè)、病原體抗體或抗原檢測(cè)、相關(guān)的蛋白檢測(cè)等。雖然GICA技術(shù)在動(dòng)物診斷上的應(yīng)用起步較晚，但發(fā)展，金標(biāo)卡殼GICA技術(shù)已經(jīng)成為目前動(dòng)物醫(yī)學(xué)檢測(cè)中   、敏感的免疫學(xué)檢測(cè)方法之一。由于該技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、特異、靈敏和等優(yōu)點(diǎn)，因此特別適合廣大的基層獸醫(yī)人員使用，適用于大批量檢測(cè)以及大面積普查等，具有廣闊的應(yīng)用前景和巨大的發(fā)展?jié)摿Α?br/>　　1、膠體金　膠體金又叫金溶膠，是氯金酸在還原劑如硼氫化鈉、白磷、過(guò)氧化氫、乙醇、蹂酸、構(gòu)椽酸鈉、抗壞血酸等的作用下，聚合成特定大小的金顆粒。金顆粒在堿性溶液中其表面帶有負(fù)電荷，金顆粒之間的靜電排斥力使在溶液中形成穩(wěn)定的膠體。如果溶液中存在較大的分子，比如蛋白質(zhì)分子時(shí)，蛋白質(zhì)分子表面的正電荷就會(huì)與金顆粒表面的負(fù)電荷結(jié)合，蛋白質(zhì)分子上就會(huì)吸附金顆粒，并且蛋白質(zhì)的生物活性依然不會(huì)受到影響。膠體金溶液會(huì)隨著溶液濃度的升高其顏色將由桔紅色變?yōu)樽霞t色。正是由于膠體金具有化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、能夠吸附以及顏色變化的特性，使得膠體金具備了成為檢測(cè)標(biāo)記物的特點(diǎn)。
　　2、膠體金免疫技術(shù)　膠體金免疫技術(shù)是以膠體金作為檢測(cè)標(biāo)記物，應(yīng)用于抗原抗體反應(yīng)的一種新型免疫檢測(cè)技術(shù)。主要利用了金顆粒的高電子、特性，在顯微鏡下可見(jiàn)金標(biāo)蛋白結(jié)合處有黑褐色的顆粒，當(dāng)這些標(biāo)記物大量聚集在相應(yīng)的配體處時(shí)，呈現(xiàn)出肉眼可見(jiàn)的粉紅色或紅色斑點(diǎn)，因而被用于定性或半定量的免疫檢測(cè)中。
　　3、膠體金免疫層析技術(shù)　GICA技術(shù)是將膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)以及層析分析技術(shù)等多種檢測(cè)方法結(jié)合在一起的一種固相標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)。其原理是以條狀纖維層析材料為固相，將已知的特異性抗原(或抗體)固定于膜的某一區(qū)帶(檢測(cè)帶)，膠體金標(biāo)記物干燥在玻璃纖維的結(jié)合釋放墊上，一端與膜相連，另一端與樣品墊相連，膜的另一端連有吸水墊。檢測(cè)時(shí)，在樣品墊處加入待檢樣品(血清、全血、尿或其它體液)后，樣品將沿層析方向向前移動(dòng)，樣品中的待檢物會(huì)與層析材料上針對(duì)該待檢物的受體(抗原或抗體)結(jié)合，發(fā)生高親和性和高特異性的免疫反應(yīng)。層析過(guò)程中，形成的免疫復(fù)合物將被截留或富集在檢測(cè)帶上，標(biāo)記物(膠體金)會(huì)呈現(xiàn)直觀的顯色試驗(yàn)現(xiàn)象。若樣品中不含待檢物，則會(huì)同游離標(biāo)記物一起到達(dá)控制線。