金標(biāo)卡殼GICA技術(shù)動物疾病病毒的檢測

　　口蹄疫(FMD)被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類之   。其病原口蹄疫病毒(FMDV)的O型呈流行趨勢，其次為A型和AsiaⅠ。蔣韜等建立了檢測口蹄疫病毒O、A、AsiaⅠ型的定型診斷膠體金免疫層析方法。用純化的金標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)株O、A、AsiaⅠ型口蹄疫抗體和羊抗鼠抗體分別包被在纖維素膜上作為檢測帶和質(zhì)控帶，組裝成定型診斷試劑盒。結(jié)果顯示，所研制的試紙條有較好的靈敏度，可檢測到7.8萬LD50(1：128倍稀釋的乳鼠毒)的病毒量。同時，通過陽性陰性樣品進(jìn)行3次重復(fù)檢測，其結(jié)果相同，說明有很好的重復(fù)性。在特異性方面，和與口蹄疫臨床癥狀有相似的病原如豬水疤病病毒、水泡性口炎病毒、水泡性疹病毒均無交叉反應(yīng)。而林彤等建立的AsiaⅠ型口蹄疫病毒膠體金金標(biāo)卡殼試紙條不與口蹄疫病毒A、O、C型以及豬水疤病病毒發(fā)生交叉反應(yīng)，有良好的特異性。并且與其它傳統(tǒng)診斷方法的符合率達(dá)98.8%。
　　在我國，豬輪狀病毒感染相當(dāng)普遍，劉兆磊等建立的A群豬輪狀病毒膠體金免疫層析試紙條的   低檢測限為1：32稀釋的病毒培養(yǎng)液。不同批次的金標(biāo)卡殼試紙條的重復(fù)檢測結(jié)果無差異，并且與豬傳染性胃腸炎病毒、流行性腹瀉病毒不發(fā)生交叉反應(yīng)，具有較好的特異性。
　　禽流感(AI)和新城疫(ND)是世界范圍內(nèi)   重要的兩個禽類傳染病。傳統(tǒng)的檢測方法較為耗時或需要儀器及人員，不利于滿足現(xiàn)場檢測的要求。彭伏虎利用雙抗夾心法分別研制了H5、H9亞型禽流感病毒膠體金免疫層析檢測及鑒別診斷試紙條、禽流感和新城疫病毒膠體金免疫層析檢測及診斷試紙條。結(jié)果表明，所研制的金標(biāo)卡殼試紙條均不與其它禽類病毒發(fā)生反應(yīng)，有非常強(qiáng)的特異性。同時，還采用一膜包被多種抗體的方法，建立了AIV和NDV鑒別診斷試紙條，同樣具有較強(qiáng)的特異性和較高的靈敏度，可用于AIV和NDV的檢測和鑒別診斷。徐一鳴等研制出了針對H3和H7亞型禽流感病毒的膠體金診斷試紙條。用H3和H7亞型單克隆抗體制備金標(biāo)抗體。再以純化的馬抗H3和H7亞型AIV多抗和山羊抗鼠二抗分別包被在硝酸纖維素膜(NC)上作為檢測線和質(zhì)控線，制備成膠體金試紙條。經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)陽性抗原檢測，結(jié)果與血凝試驗(yàn)、血凝試驗(yàn)、AC-ELISA和RT-PCR方法相符。在特異性方面，與H5和H9亞型AIV標(biāo)準(zhǔn)抗原、病料以及傳染性、新城疫等抗原均無交叉反應(yīng)，這說明有較好的特異性。
　　鵝副粘病毒(GMPV)病是上個世紀(jì)末   發(fā)現(xiàn)的鵝的一種烈性傳染病，已在多省呈爆發(fā)流行。常規(guī)檢測方法無法在基層廣泛使用，因此，建立的檢測方法顯得極為   。王翌等研制了鵝副粘病毒膠體金檢測卡，該檢測卡可以檢測鵝副粘病毒尿囊液。與新城疫Lasota株、孔雀源、鴿源、雞源新城疫病毒感染的尿囊液出現(xiàn)陽性反應(yīng)；而與雞減蛋綜合征病毒、傳染性法氏囊炎病毒、傳染性病毒、小鵝瘟病毒雞胚或鴨胚尿囊液和麻疹病毒、犬瘟熱病毒細(xì)胞培養(yǎng)物呈陰性反應(yīng)。