膠體金快速檢測(cè)技術(shù)

　　免疫膠體金檢測(cè)技術(shù)主要包括斑點(diǎn)免疫金滲濾法(DIGFA)和膠體金免疫層析法(CGEIA)，其基本原理均是以微孔膜為固相載體，包被已知抗原或抗體，加入待測(cè)樣本后，經(jīng)微孔膜的滲濾作用或毛細(xì)管虹吸作用使標(biāo)本中的抗體或抗原與膜上包被的抗原或抗體結(jié)合，再通過膠體金標(biāo)記物與之反應(yīng)形成紅色的可見結(jié)果而達(dá)到檢測(cè)目的。
　　1、斑點(diǎn)免疫金滲濾法(DIGFA)
　　又叫滴金免疫滲濾試驗(yàn)(DIFA)，由SpielbergF等于1989年建立，為穿流形式(FlowThrough)。該實(shí)驗(yàn)以微孔膜為固相載體，其上固定有已知特異性抗原或抗體，將其裝入充滿吸水材料的滲濾裝置中，加入待檢標(biāo)本后，經(jīng)濾膜的毛細(xì)管作用或滲濾作用使標(biāo)本中的抗原或抗體與膜上包被的抗體或抗原結(jié)合，再用膠體金結(jié)合物標(biāo)記而達(dá)到檢測(cè)目的。反應(yīng)可根據(jù)待測(cè)物的不同，選擇不同試驗(yàn)方法，特別適合于間接法檢測(cè)抗體或捕獲法檢測(cè)IgM。一般需要3~5步，但所需時(shí)間很短，只需3~6min。
　　2、膠體金免疫層析法(CGEIA)
　　該試驗(yàn)是在免疫滲濾試驗(yàn)的基礎(chǔ)上建立的一種簡(jiǎn)易的檢測(cè)技術(shù)，由BeggsM等   先用于人絨毛膜促性腺(HCG)的測(cè)定，為側(cè)向橫流形式((LateralFlow)。該技術(shù)也是以微孔膜為固相載體，其原理是將已知的特異性抗原(或抗體)固定于膜上作為檢測(cè)帶，膠體金標(biāo)記物干燥在玻璃纖維的結(jié)合釋放墊上，其一端與膜相連，另一端與樣品墊相連膜的另一端連有吸水墊。當(dāng)加人待測(cè)樣品(全血、血清、尿或其他體液)后，樣品通過毛細(xì)管的擴(kuò)散作用向前移動(dòng)，并通過含標(biāo)記物的玻璃纖維，使標(biāo)記物重新水化，并與膠體金標(biāo)記物相互反應(yīng)，然后一起向前泳動(dòng)，至檢測(cè)線(固定有特異性抗原或抗體)時(shí)標(biāo)記物與待測(cè)物的復(fù)合物會(huì)被檢測(cè)線截獲，而出現(xiàn)明顯而直觀的紅色結(jié)果。如果樣品中不含待測(cè)物，則會(huì)和游離標(biāo)記物一起越過檢測(cè)線，到達(dá)質(zhì)控線或試驗(yàn)終止線，被截獲而出現(xiàn)紅色的對(duì)照結(jié)果。多采用夾心法檢測(cè)抗原或間接法檢測(cè)抗體，也有采用雙孔間接法或反流免疫層析法檢測(cè)IgG和IgM對(duì)于小分子抗原(如殘留、類固醇的測(cè)定等)來說則宜采用競(jìng)爭(zhēng)法。